فينيل جالاكتوزيد CAS:2818-58-8

التأثير على نشاط الإنزيم: يستخدم فينيل جالاكتوزيد عادة لقياس نشاط إنزيم بيتا جالاكتوزيداز.عندما يتم تحلل فينيل جالاكتوزيد بواسطة بيتا جالاكتوزيداز، فإنه يطلق بارا نيتروفينول.يمكن قياس تراكم p-nitrophenol كميًا، مما يوفر نظرة ثاقبة لنشاط β-galactosidase.يتم تسخير هذا التأثير في تطبيقات مثل فحوصات الإنزيم وأنظمة الفحص.

تحليل التعبير الجيني: غالباً ما يستخدم فينيل جالاكتوزيد كركيزة في تجارب البيولوجيا الجزيئية لدراسة التعبير الجيني.عادةً ما يتم دمج جين lacZ، الذي يشفر β-galactosidase، مع تسلسلات تنظيمية للجينات الأخرى محل الاهتمام.يمكن أن يشير التعبير عن جين lacZ والتحلل المائي للفينيل جالاكتوزيد بواسطة β-galactosidase إلى نمط التعبير ومستوى الجين المستهدف الذي تتم دراسته.

أنظمة الفحص: يعد الفينيل جالاكتوزيد مكونًا مهمًا في أنظمة الفحص التي تستفيد من نشاط بيتا جالاكتوزيداز.أحد الأمثلة المعروفة على نطاق واسع هو طريقة الفحص باللونين الأزرق والأبيض، والتي تستخدم لتحديد الخلايا المؤتلفة أو المتحولة في تجارب البيولوجيا الجزيئية.المستعمرات التي نجحت في تناول الحمض النووي المؤتلف أو خضعت لإعادة التركيب الجيني سوف تعبر عن β-جالاكتوزيداز، مما يؤدي إلى التحلل المائي للفينيل جالاكتوزيد وتكوين اللون الأزرق.

تنقية البروتين: في بعض الحالات، يمكن استخدام فينيل جالاكتوزيد كرابط للتحليل اللوني المتقارب لتنقية البروتينات التي ترتبط بشكل خاص بـ β-galactosidase أو يتم تنشيطها بواسطة.قد يحتوي البروتين محل الاهتمام على علامة تقارب أو علامة اندماج تحتوي على مجال ربط β-galactosidase.عن طريق تمرير خليط البروتين من خلال عمود مع فينيل جالاكتوزيد المثبت، يمكن الاحتفاظ بالبروتين المطلوب بشكل انتقائي وشطفه لاحقًا.